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摘要
目的：探讨黄芪对于大黄诱导腹泻大鼠肠道炎症、肠道屏障和肠道菌群的治疗作用，并阐明其可能的作用机制。方法：50只大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组(2.468 g·kg-1参苓白术散)、低剂量(1.35 g·kg-1)黄芪组和高剂量(2.70 g·kg-1)黄芪组，每组10只。采用大黄灌胃结合饮食不节复制大鼠腹泻模型，检测各组大鼠体质量、粪便含水量和腹泻评分；HE染色观察各组大鼠结肠组织病理形态表现，Western blotting法检测各组大鼠结肠组织中蛋白酶激活受体2 (PAR-2)、磷酸化p38 (p-p38)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)、闭锁蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)、Toll样受体4 (TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6 (TRAF6)、髓样分化因子88 (MyD88)和核因子κB (NF-κB)蛋白表达水平；采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血清中胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素10 (IL-10)、丙二醛(MDA)和分泌型免疫球蛋白A(SIgA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性；16S r DNA基因测序分析各组大鼠肠道菌群情况。结结果果：与对照组比较，模型组大鼠体质量明显降低(P<0.01)，粪便含水量和腹泻评分明显升高(P<0.01)，血清中MTL和GAS水平明显升高(P<0.01)；与模型组比较，阳性对照组、低剂量黄芪组和高剂量黄芪组大鼠体质量明显升高(P<0.01)，粪便含水量和腹泻评分明显降低(P<0.01)，血清中MTL和GAS水平明显降低(P<0.01)。HE染色，与对照组比较，模型组大鼠结肠组织上皮黏膜损伤，有大量炎症细胞浸润，腺体排列紊乱；与模型组比较，阳性对照组和高剂量黄芪组大鼠结肠组织上皮黏膜结构较规则，炎症细胞浸润较少，未见明显腺体紊乱，低剂量黄芪组大鼠结肠组织上皮黏膜结构可见轻微损伤，有部分炎症细胞浸润，腺体排列较整齐。Western blotting法检测，与对照组比较，模型组大鼠结肠组织中PAR-2、 MLCK、 TLR4、 TRAF6、MyD88、 NF-κB、 p-p38和p-MLC蛋白表达水平明显升高(P<0.01),ZO-1和Occludin蛋白表达水平明显降低(P<0.01)；与模型组比较，阳性对照组、低剂量黄芪组和高剂量黄芪组大鼠结肠组织中PAR-2、MLCK、TLR4、TRAF6、MyD88、NF-κB、p-p38和p-MLC蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),ZO-1和Occludin蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与对照组比较，模型组大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和MDA水平明显升高(P<0.01),IL-10和SIgA水平及SOD活性明显降低(P<0.01)；与模型组比较，阳性对照组、低剂量黄芪组和高剂量黄芪组大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和MDA水平明显降低(P<0.01),IL-10和SIg A水平及SOD活性明显升高(P<0.01)。肠道菌群检测，在门水平上，与对照组比较，模型组大鼠肠道菌群中变形菌门和疣微菌门丰度明显升高(P<0.01)；与模型组比较，低和高剂量黄芪组大鼠肠道菌群中变形菌门和疣微菌门丰度明显降低(P<0.01)，高剂量黄芪组大鼠肠道菌群中ε-变形菌门丰度明显升高(P<0.01)。结论：黄芪对大黄诱导的腹泻模型大鼠有治疗作用，其机制可能与通过TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路抑制肠道炎症，进而修复肠道屏障，恢复肠道菌群组成有关。
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