棉花GhDMT3的功能验证及生物信息学分析

作者：杨笑敏; 王俊娟; 王德龙; 陆许可; 陈修贵; 郭丽雪; 王帅; 陈超; 王晓歌; 韩明格; 叶武威^*

来源：生物技术通报, 2019, 35(01): 11-16.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0724

• 陆地棉
• GhDMT3
• 生物信息学分析
• VIGS沉默

通过构建棉花GhDMT3的VIGS沉默载体并侵染棉花,探究该基因在棉花和高等植物中的功能。采用生物信息学方法对棉花DNA甲基转移酶基因GhDMT3(CotAD46796)的DNA序列结构特性、该基因编码的蛋白质的理化性质、疏水性和蛋白二级结构等方面进行分析。克隆该基因,并构建pYL156:GhDMT3沉默载体。蛋白质相对分子质量为71 107.02 kD,等电点为4.85,不稳定系数为36.33。不同胁迫处理(冷、干旱)VIGS沉默GhDMT3的棉花幼苗表现出明显的表型差异。qRT-PCR的表达模式分析发现,不同胁迫下p YL156侵染的棉花中不同部位表达量没有变化,用pYL156:GhDMT3侵染过的棉花中GhDMT3转录水平与对照相比明显下降。与未沉默GhDMT3的棉花幼苗相比,沉默GhDMT3的棉花幼苗抗逆性显著增强。

• 单位
  中国农业科学院棉花研究所; 棉花生物学国家重点实验室; 农业部