摘要

目的观察转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads通路在0.5 Gy X线照射促进成骨细胞分化过程的作用。方法 0.5 Gy X线照射成骨细胞后,评估Ⅰ型胶原α(Col1α)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)、Runt相关转录因子2(Runx2)、成骨细胞特异转录因子(Osterix)蛋白表达水平以及矿化功能。应用实时定量聚合酶链反应及Western blot检测TGF-β1/Smads信号通路中关键分子TGF-β1及受体激活素受体样激酶5(ALK5)、Smad2/3的表达变化。结果 0.5 Gy X线照射促进MC3T3-E1成骨细胞矿化成熟。Western blot检测显示MC3T3-E1细胞在0.5 Gy X线照射后Col1α、ALP、OCN、Runx2、Osterix蛋白表达水平发生动态变化。照射后4d成骨细胞TGF-β1 mRNA表达水平升高1.7倍(t=8.414,P=0.000),受体ALK5 mRNA在4 d和7 d时分别升高2.2倍(t=12.660,P=0.000)和2.5倍(t=10.380=0.000)。酶联免疫吸附测定(ELISA)显示X线照射成骨细胞后4 d和7 d培养上清中活化TGF-β1分别为(310.42±36.39)pg/ml(P=0.007)、(420.13±40.61)pg/ml(P=0.000)。在0.5 Gy X线照射后7 d时,成骨细胞p-Smad2的蛋白表达明显升高(80.56±7.14,P=0.009)。结论 0.5 Gy X线照射促进成骨细胞分化的过程中TGF-β1/Smad2/3信号通路具有重要调控作用。