细粒棘球绦虫AgB8/1重组抗原表达系统的构建

作者：古力帕丽·麦曼提依明; 马海梅; 陈洁; 陈璐; 吾拉木·马木提

来源：新疆医科大学学报, 2011, (03): 246-250.

• 细粒棘球绦虫
• AgB8/1重组抗原
• 原核表达质粒 Echinococcus granulosus
• AgB8/1 recombinant antigen
• prokaryotic expression plasmid

目的构建pET32a-AgB8/1原核表达载体,并对其重组蛋白进行原核细胞表达。方法从细粒棘球绦虫原头蚴中提取总RNA,反转录生成cDNA,以此cDNA为模板用基因特异性引物扩增EgAgB8/1基因编码其分泌型多肽的片段,经测序后,以此基因片段为依据,人工合成合成EgAgB8/1抗原编码核酸序列,将其克隆至pUCm-T载体,测序鉴定其正确性。通过对pUCm-T/AgB8/1重组质粒进行双酶切,将获得的AgB8/1抗原编码核酸序列用定向克隆技术克隆至原核表达质粒pET32a上,测序鉴定插入片段正确性后,转化至E.coli BL21(DE3)Lys S,IPTG初步诱导表达pET32a-AgB8/...

• 单位
  新疆医科大学第一附属医院; 新疆医科大学