基于Rho/ROCK通路介导的细胞凋亡探讨补肝散对衰老大鼠心肌损伤的影响

作者：白德高; 张月; 霍冉; 王杰鹏; 方芳; 方朝义^*

来源：中药新药与临床药理, 2022, 33(08): 1032-1039.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2022.08.005

• 衰老
• Rho/ROCK信号通路
• 细胞凋亡
• 补肝散
• 大鼠
• 心肌损伤

目的 观察衰老大鼠心肌损伤特征并探讨补肝散的干预机制。方法 将 32 只 SPF 级 SD 雄性大鼠随机分为空白组、模型组、补肝散组和维生素 E 组，除空白组腹腔注射等量生理盐水外，其余各组均腹腔注射 D-半乳糖(D-galactose,D-gal)制备衰老大鼠模型。模型复制当日起，补肝散组与维生素 E 组分别灌胃浓度为14.06 g · kg-1的补肝散和 27 mg·kg-1的维生素 E，空白组和模型组给予等量生理盐水。以上均每日 1 次，连续8 周，并于模型复制末日测定抓力。取血清及心脏组织，测定心脏脏器指数；检测血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性变化；检测血清谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)含量；苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理形态学变化；Masson 染色观察大鼠心肌组织胶原沉积和纤维化情况；TUNEL 染色观察心肌细胞凋亡情况；免疫组织化学染色(ABC 法)观察 Ras 同源基因 A(RhoA)、Rho 相关卷曲螺旋形成蛋白激酶 1(ROCK1)、Bcl-2 相关 X 蛋白(Bax)和 B 细胞淋巴瘤 2(Bcl-2)表达特征；免疫印迹法(Western Blot)检测心肌组织 RhoA、ROCK1、Bax 和 Bcl-2 的蛋白表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠心肌细胞形态改变，呈现嗜酸性变性，胞质染色不均，部分心肌细胞坏死，心肌组织胶原沉积和纤维化明显；抓力及心脏脏器指数降低，MDA 含量升高，SOD 活性降低，心肌细胞凋亡指数及 AST、CK、LDH 含量升高(均P<0.05);RhoA、ROCK1、Bax 蛋白表达增加，Bcl-2 蛋白表达减少(均 P<0.05)。与模型组比较，补肝散组大鼠心肌细胞轻度嗜酸性变性，偶有坏死、肥大情况，心肌组织胶原沉积较少，偶有纤维化产生，损伤情况较轻；大鼠抓力及心脏脏器指数升高，MDA 含量降低，SOD 活性升高，心肌细胞凋亡指数及 AST、CK、LDH 含量降低(均 P<0.05);RhoA、ROCK1、Bax 蛋白表达减少，Bcl-2 蛋白表达增加(均 P<0.05)。结论 补肝散可通过调节 Rho/ROCK 介导的凋亡途径减轻衰老大鼠的心肌损伤，此为探讨肝气虚致衰理论提供了新的思路和实验支持。

• 单位
  河北中医学院