SK-N-SH神经母细胞瘤干细胞培养及鉴定

作者：谢艳; 宿玉玺; 覃佳强; 南国新; 黄世峰; 王忠良; 蔡文全

来源：中国组织工程研究, 2014, 18(45): 7260-7265.

DOI：10.3969/j.issn.2095-4344.2014.45.009

• 肿瘤
• 神经母细胞瘤
• 肿瘤干细胞
• 神经干细胞
• 干细胞
• 悬浮培养法
• 细胞培养
• 裸鼠
• 荧光素酶
• 国家自然科学基金

背景:神经母细胞瘤是儿童较为常见的实体瘤,儿童肿瘤受环境因素影响小,其与发育的关系紧密。而悬浮法是一种有效并可靠的获得肿瘤干细胞的方法。目的:采用悬浮法培养人神经母细胞瘤SK-N-SH,获得具有干细胞特性的克隆球,并对其生物学特性进行鉴定。方法:采用无血清悬浮培养的方法,获得具有克隆性增生的肿瘤球,免疫荧光鉴定克隆球细胞是否具有干细胞特性;通过荧光素酶标记SK-N-SH神经母细胞瘤,将所得克隆球与普通培养肿瘤细胞种植在裸鼠背部,活体成像监测细胞在裸鼠体内的增殖特性。结果与结论:悬浮培养法可将SK-N-SH神经母细胞瘤培养成克隆球,将无血清培养的克隆球免疫荧光检测分子生物学标记,显示强阳性表达,将其种植于裸鼠背部皮下显示其具有较强增殖与转移的生物学特性。提示悬浮法培养的SK-N-SH神经母细胞瘤克隆球,分子生物学标记巢蛋白Nestin强表达,胶质原纤维酸性蛋白、特异性神经元管蛋白(Tuj-1)弱表达,具有神经干细胞的特性,在裸鼠体内具有较强的增殖性与转移侵袭性。

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院; 重庆医科大学附属第一医院; 重庆市渝北区妇幼保健院