黑曲霉脂肪酶基因的克隆及其在黑曲霉中的同源表达

作者：赵书范; 李琪; 聂红梅; 汪钊; 郑建永^*

来源：食品与发酵工业, 2022, 48(09): 14-19.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.029413

• 黑曲霉
• 脂肪酶
• 基因克隆
• 同源表达
• 酶学性质

旨在研究黑曲霉脂肪酶基因在黑曲霉中的同源表达情况。利用黑曲霉基因组作为模板克隆8种脂肪酶基因，与双元表达载体pCAMBIA连接构建8个表达载体。通过原生质体-PEG转化法，实现8个脂肪酶基因在黑曲霉中同源表达，其中转化子MA-H3-PglaA-SglaA脂肪酶活性最高。对该酶进行分离纯化和酶学性质表征，酶最适温度45℃,最适pH 7.5,K+、Mg2+等金属离子对脂肪酶有显著激活作用。酶底物特异性实验发现，该酶对底物pNPA亲和力最高，脂肪酶ANL-H3的Km为1.893 mmol/L,Vmax为1.610 mmol/(L·min)。该研究为黑曲霉脂肪酶的同源表达提供了有效的策略和数据支持，可为食品级脂肪酶的开发和应用提供理论基础。

• 单位
  浙江工业大学; 生物工程学院