鸡NLRX1受体基因的原核表达及抗体制备

作者：刘雪兰; 寇家倩; 周梦琴; 丁泠; 谭烁佳; 朱祥

来源：安徽农业大学学报, 2020, 47(02): 167-172.

DOI：10.13610/j.cnki.1672-352x.20200518.005

• 鸡NLRX1
• 蛋白表达与纯化
• 多克隆抗体制备
• 特异性

NLRX1(NLR family member X1)是一种调控天然免疫应答的重要模式识别受体。首先应用PCR方法分别对鸡NLRX1基因的编码区和N端1～492 bp截短序列进行PCR扩增并克隆到原核表达载体p ET-32a(+),以IPTG诱导重组菌表达,获得了重组NLRX1蛋白和N端截短表达蛋白(r NLRX1-part)。其次将纯化的截短重组蛋白r NLRX1-part免疫新西兰兔,以间接酶联免疫吸附实验(ELISA)检测制备的抗体效价为1∶512 000。应用Western blot方法分析显示,该抗体不仅可特异性结合原核表达NLRX1蛋白也可有效识别鸡DF-1细胞中过表达NLRX1蛋白。

• 单位
  动物科技学院; 安徽农业大学