TAT-GFP-ERβ融合蛋白的原核表达与鉴定

作者：于林; 王春雨; 杨睿; 王亮; 石建党; 张琚

来源：南开大学学报(自然科学版), 2008, 41(4): 55-58.

DOI：10.3969/j.issn.0465-7942.2008.04.010

• TAT
• 蛋白转导
• 原核表达
• 雌激素受体β

从前列腺中提取总RNA,RT-PCR获得ERβ基因,将其联人pEGFP载体,得到重组质粒pEGFP-ERβ,再将上述质粒的GFP-ERβ片段亚克隆于pTAT-2.1质粒,形成pTAT-GFP-ERβ重组质粒.在BL21工程菌中IPTG诱导表达TAT-GFP-ERβ融合蛋白.用Western Blot鉴定纯化的融合蛋白的免疫原性.用纯化的蛋白转导事先转染ERE-Luc报道质粒的Hela细胞,用Luciferase Assay鉴定转导蛋白的生物学活性.证明TAT-GFP-ERβ蛋白具有完整的生物活性.

• 单位
  南开大学