摘要
目的制备抗血管紧张素Ⅰ(angiotensin I,AⅠ)的杂交瘤细胞株,比较不同连接载体产出杂交瘤细胞的效果。方法通过对载体分别为牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)的AⅠ-BSA和AⅠ-OVA免疫原进行小鼠免疫,将骨髓瘤细胞与免疫合格的小鼠进行脾细胞融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株,经过克隆、扩大培养、腹水诱生等工序,生产出AⅠ单克隆抗体,测定并比较不同连接载体产出杂交瘤细胞抗体的性能,筛选具有应用价值的抗体。结果本方法共产出9株AⅠ杂交瘤细胞株,其中AⅠ-OVA组产出4株,AⅠ-BSA组产出5株,进行各细胞抗体的功能检验,测定亚型、亲合常数,与AⅡ、1~7氨基酸肽段、5~8氨基酸肽段以及1~9氨基酸肽段均无交叉反应,优选出AⅠ-BSA组的D11C12单抗建立检测方法进行性能评价,空白限为0.04ng/mL,低值样本的分析内精密度为4.5%,高值样本的分析精密度为3.5%,与对照试剂盒进行68例样本检测结果相关性对比,r为0.9728。结论成功建立抗血管紧张素Ⅰ杂交瘤细胞株制备方法,可以满足AⅠ单克隆抗体的使用要求。
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单位北京北方生物技术研究所