四种南美白对虾常见病原微流控芯片联检方法的测试

作者：王李宝; 黎慧; 于志君; 史文军; 冯卫; 赵然; 沈辉; 成婕; 管小平; 秦亚兵; 万夕和^*

来源：江苏农业学报, 2023, 39(02): 471-478.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4440.2023.02.020

• 南美白对虾
• 病原
• 微流控芯片
• 联检

为评估微流控芯片法在虾肝肠胞虫(EHP)、致急性肝胰腺坏死病副溶血性弧菌(VpAHPND)、十足目虹彩病毒1(DIV1)和白斑综合征病毒(WSSV)4种南美白对虾常见病原联检中的各项性能，设计针对上述4种病原扩增反应的引物，对已有芯片进行新的功能划分，同时优化该基因芯片的反应体系及恒温扩增条件。结果表明，优化的联检方法可同时检测上述4种病原，特异性好，30 min反应时间即可给出病原联检结果。EHP、 DIV1、WSSV、VpAHPND指标检出限分别为1μl 0.57拷贝、0.43拷贝、2.12拷贝、3.18拷贝，已达到甚至超过了环介导等温扩增技术(LAMP)检测的灵敏性。本次测试中的南美白对虾4种病原微流控芯片联检方法所用的检测试剂盒具有操作简便、检测灵敏、特异性强、检测时间短、设备要求简单等特点，适合整个养殖过程中对南美白对虾EHP、VpAHPND、DIV1和WSSV的监测与筛查工作。

• 单位
  上海海洋大学; 江苏省海洋水产研究所