依布替尼通过新型途径克服弥漫大B细胞淋巴瘤细胞耐药机制的研究

作者：吴凌; 张翼鷟^*; 夏冰; 李晓武; 袁田; 田晨; 赵海丰; 于泳; Sotomayor E.

来源：中华血液学杂志, 2017, 38(12): 1036-1042.

• 淋巴瘤, 大B细胞, 弥漫性
• 趋化因子CXCL12
• 受体, CXCR4
• 依布替尼

目的探讨依布替尼克服弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞耐药的机制。方法①体外实验:以DLBCL细胞系SUDHL10细胞(GCB亚型)、HBL-1(ABC亚型)以及8例DLBCL患者原代细胞为研究对象, 与正常人骨髓基质细胞(MSC)共培养后, 显微镜下计数向MSC趋化迁移及与MSC黏附的DLBCL细胞数, ELISA法检测MSC的CXCL12表达水平, 流式细胞术检测DLBCL细胞的CXCR4表达水平;以携带有CXCR4的慢病毒转染HBL-1细胞, 米托蒽醌、依布替尼处理后与MSC共培养, 流式细胞术检测细胞凋亡水平;倒置显微镜下观察HBL-1细胞集落形成情况。②体内实验:以HBL-1细胞构建的NOD/SCID肿瘤模型小鼠为研究对象, 观察依布替尼治疗后肿瘤体积变化。结果①依布替尼处理后, DLBCL细胞向MSC的迁移数和与MSC的黏附比例明显降低(P值均<0.05), 并呈剂量依赖性。②与依布替尼处理前比较, 处理后MSC的CXCL12表达水平降低(SUDHL10细胞:660 pg/ml对1 400 pg/ml, P=0.004;HBL-1细胞:720 pg/ml对1 490 pg/ml, P=0.018;DLBCL原代细胞:850 pg/ml对1 450 pg/ml, P=0.004), DLBCL细胞的CXCR4表达水平降低(P值均<0.05)。③共培养时, 对照组、米托蒽醌组、依布替尼组、米托蒽醌组+依布替尼组的HBL-1细胞凋亡比例分别为15.1%、17.5%、23.5%、58.7%, 转染过表达CXCR4后, HBL-1细胞凋亡比例分别为14.2%、16.1%、22.5%、38.3%, 共培养联合用药组HBL-1细胞凋亡比例高于单药培养组, 差异均有统计学意义(P值均<0.05)。④对照组、MSC组、依布替尼组、MSC组+依布替尼组集落数分别为113±5、205±4、62±9、123±3(每孔2.5×103), 模型小鼠皮下肿瘤体积分别为6 500、17 000、4 000、10 000 mm3, 依布替尼处理后较处理前集落数和肿瘤体积明显减少, 差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论依布替尼靶向作用于CXCL12/CXCR4轴, 抑制CXCR4表达从而克服MSC介导的耐药作用, 并且能够在体内外抑制MSC促淋巴瘤细胞集落形成的作用。为依布替尼治疗复发耐药DLBCL提供了理论依据。