冷刺激对小鼠肺泡巨噬细胞表型的影响

作者：李倩茹; 周博文; 李鑫月; 逯静静; 徐彬; 杨焕民^*

来源：中国生物制品学杂志, 2023, 36(08): 930-940.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003963

• 冷刺激
• 小鼠肺泡巨噬细胞
• MH-S细胞
• 炎性因子

目的 探讨冷刺激对小鼠肺泡巨噬细胞（MH-S细胞）表型的影响。方法 将MH-S细胞置37℃培养24 h，于36、34、32℃分别冷刺激0、0.5、1、3、6、9、12 h,qRT-PCR法检测MH-S细胞中炎性因子白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)及白介素-10(interleukin-10,IL-10)基因mRNA转录水平。将MH-S细胞置37℃培养24 h，于34℃冷刺激0.5 h,qRT-PCR法检测MH-S细胞中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、精氨酸酶（Arginase1,Arg1）基因mRNA转录水平（以冷刺激0 h为对照）；免疫荧光法检测iNOS和Arg1的表达情况（以37℃培养0.5 h的MH-S细胞为阴性对照）；Western blot法检测iNOS、TNF-α及核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)的表达水平（以37℃培养0.5 h的MH-S细胞为阴性对照）。结果 34℃培养0.5 h条件下，MH-S细胞中IL-1β及IL-10基因mRNA转录水平最高，因此采用该条件建立MH-S细胞的冷刺激模型。与0 h比较，34℃培养0.5 h的MH-S细胞中iNOS、TNF-α和Arg1基因mRNA转录水平均明显升高（t分别为3.733、12.190、6.793,P均<0.05）。与阴性对照组比较，刺激组MH-S细胞中iNOS及Arg1的荧光表达强度均有所增强，其中iNOS增强更为明显。与阴性对照组比较，刺激组MH-S细胞中iNOS和TNF-α蛋白表达水平升高，但差异无统计学意义（t分别为0.675和1.514,P均> 0.05）;NF-κB表达水平明显升高（t=3.092,P <0.05）。结论 34℃冷刺激0.5 h可提高MH-S细胞中IL-1β、IL-10、TNF-α、iNOS、Agr1、NF-κB等炎性相关因子的表达，可激活MH-S细胞中的NF-κB信号通路，诱导炎症蛋白表达，促进细胞活化。

• 单位
  动物科技学院; 黑龙江八一农垦大学