携带siANGPTL4重组腺病毒的构建及其对MG63增殖的抑制作用

作者：洪思琦; 毕杨; 郭振华; 陈镜宇; 李映良

来源：第三军医大学学报, 2011, (01): 28-32.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2011.01.006

• 腺病毒
• 血管生成素样蛋白4
• 转染
• 骨肉瘤
• 红色荧光蛋白 adenovirus
• angiopoietin-like 4
• transfection
• osteosarcoma
• red fluore scent protein RFP

目的应用AdEasy腺病毒改良载体系统构建携带siANGPTL4基因的重组腺病毒,进一步研究ANGPTL4基因对骨肉瘤细胞株MG63增殖的影响。方法将设计的siRNA靶点寡聚核苷酸克隆到pSES-HUS载体构建重组质粒pSES-siANGPTL4,在B J5183大肠杆菌内与pAdEasy1骨架质粒完成同源重组;经脂质体介导转入HEK293细胞包装、扩增并经反复感染获得携带siANGPTL4基因的重组腺病毒Ad-siANGPTL4;有限稀释法检测病毒滴度;根据加入的重组腺病毒携带的基因不同将实验细胞分为阴性对照组、RFP组(加入Ad-RFP)、ANGPTL4组(加入Ad-ANGPTL4)及si...

• 单位
  重庆医科大学; 重庆医科大学附属儿童医院