日落黄酶联免疫试剂盒的制备及应用

作者：谢倩; 李庆; 李佳楠^*

来源：现代食品科技, 2021, 37(06): 326-332.

DOI：10.13982/j.mfst.1673-9078.2021.6.0947

• 日落黄
• 人工抗原
• 单克隆抗体
• 酶联免疫吸附试验(ELISA)

为了快速准确检测食品中的日落黄,本研究通过羰基二咪唑法,将日落黄与载体蛋白偶联,并使用紫外光谱进行鉴定,结果显示日落黄检测抗原和免疫抗原成功合成;通过免疫小鼠制备了效价高达1:64000以上的抗日落黄单克隆抗体,研制了日落黄ELISA检测试剂盒。试剂盒性能检测分析结果显示,试剂盒标准曲线的线性检测范围为62.50～1000 ng/mL,检测限为1.50 ng/mL,检测灵敏度IC50值为6.50 ng/mL;试剂盒中,用于检测的单克隆抗体对日落黄的交叉反应率为100%,对诱惑红有弱交叉反应,反应率为2%,与其他2种色素添加剂未见交叉反应;检测市售果汁、水果罐头和果冻类样品的批内、批间回收率分别为89.18%～101.13%、87.69%～97.90%,且批内、批间试验的相对标准偏差均小于10%,说明试剂盒具有良好的灵敏度和准确性,且操作方便快捷。本研究应用免疫学方法成功地制备了日落黄酶联免疫试剂盒,并检测了水果类制品中添加的日落黄,为大批量测定食品中日落黄含量提供了高效准确的实验方法。

• 单位
  生命科学学院; 武汉云克隆科技股份有限公司; 江汉大学