沉默FOXC1对宫颈癌HeLa细胞侵袭和转移能力的影响

作者：张婕; 汪露; 韩世愈^*

来源：中国生育健康杂志, 2021, 32(06): 540-602.

• 宫颈癌
• FOXC1
• 侵袭及转移

目的研究小干扰RNA(siRNA)沉默人宫颈癌细胞中叉头框蛋白C1(FOXC1)基因对宫颈癌细胞侵袭及转移能力的影响。方法研究NC104、宫颈癌CaSki、ME-180、HeLa细胞中FOXC1基因的表达,筛选出高表达FOXC1的HeLa细胞株,构建特异性慢病毒干扰载体FOXC1-shRNA,感染细胞株,通过Western blot和Real-time PCR等实验方法检测转染效率。具体分组为:感染阴性组(HeLa)、空白对照组(HeLa-GFP)、感染FOXC1-shRNA组(HeLa-FOXC1(-))。通过Transwell小室及Matrigel基质胶鉴定转染后三组细胞的迁移和侵袭性。并通过Western Blot实验方法检测转染后三组细胞中Vimentin、E-cadherin及β-catenin与EMT相关蛋白表达的变化,进一步验证转染后三种细胞迁移和侵袭性的变化。结果 RT-PCR以及Western blot结果分别提示,HeLa-FOXC1(-)组,FOXC1 mRNA以及FOXC1蛋白表达均被抑制。Transwell迁移及侵袭实验显示,HeLa-FOXC1(-)组细胞的迁移及侵袭能力明显降低,Western blot检测三组细胞中Vimentin、E-cadherin及β-catenin的表达,发现HeLa-FOXC1(-)组细胞系内Vimentin及β-catenin蛋白的表达明显降低,E-cadherin蛋白的表达有增高,以上结果差异均有统计学意义。结论敲除人宫颈癌HeLa细胞系中的FOXC1的表达,上皮间质转化相关β-catenin及Vimentin蛋白表达也随之降低。E-cadherin蛋白的表达增高,能够影响细胞的生物学行为,使其侵袭及转移能力降低。

• 单位
  哈尔滨医科大学附属第四医院