本发明公开了一种脂肪酸的合成方法,将油脂、水、甘油三酯脂肪酶、甘油二酯脂肪酶和单甘油酯脂肪酶混合进行水解反应。水解过程中使用甘油二酯脂肪酶突变体和单甘油酯脂肪酶突变体来促进甘油三酯脂肪酶水解油脂,可以显著提高合成脂肪酸的速率和纯度。当三种酶一起使用时脂肪酸的合成速率和纯度高于任何一种酶单独使用时,水解率达95%以上。本发明是一种快速、高效、绿色、便于工业化生产的合成方法。