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摘要
目的:探讨人原生殖细胞(PGC)的分离取材时机与体外培养方法,为人类胚胎生殖细胞(EG)的建系研究奠定基础。方法:取不同孕龄的人胚,分离人PGC,在不同培养体系中,观察其增殖与分化情况。结果:孕8、9周较孕7周人胚用酶机械法分离PGC后,原代克隆形成率高,以小鼠胚胎成纤维细胞或STO细胞作为饲养层,并且在培养液中加入hLIF、hbFGF、hSCF,能较好地维持人PGC的增殖并保持未分化。结论:孕8、9周龄人胚为分离PGC的适宜材料,酶机械法分离PGC简单有效,饲养层细胞与生长因子为人PGC细胞体外培养所必需。
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