重组人骨形态发生蛋白-2原核表达及单克隆抗体制备

作者：王婧; 张杰; 张颖; 马宁宁; 谢良志

来源：中国医学科学院学报, 2011, 33(05): 543-548.

DOI：10.3881/j.issn.1000-503X.2011.05.013

• 重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽
• 蛋白复性
• 单克隆抗体

目的利用原核表达系统(E.coli)表达纯化重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽(rhBMP-2m),并制备rh-BMP-2m的单克隆抗体。方法将工程菌株进行常规发酵,自诱导表达,裂菌离心分离包涵体,包涵体变性后经阳离子交换色谱分离纯化。纯化后的变性rhBMP-2m经稀释复性,获得具有生物学活性的rhBMP-2m。并以此作为抗原,免疫Balb/c小鼠制备单克隆抗体。结果获得还原SDS-PAGE下95%以上纯度的rhBMP-2m。细胞活性结果分析显示,所获得的rhBMP-2m具有较强的生物学活性。免疫小鼠最终获得两株稳定分泌抗rhBMP-2m抗体的杂交瘤细胞株。结论成功制备了具有生物学活性的rhBMP-2m及其单克隆抗体,为rhBMP-2未来的研究和制备奠定良好的基础。

• 单位
  中国医学科学院北京协和医学院