双峰驼TLR3蛋白的表达与抗体制备及在肾脏的分布

作者：张睿; 李沛轩; 刘转霞; 刘静宇; 房映栋; 刘柯江; 张旺东; 王雯慧^*

来源：动物医学进展, 2023, 44(06): 59-64.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2023.06.014

• 双峰驼
• Toll样受体3
• 原核表达
• 抗体制备
• 肾脏

为制备双峰驼Toll样受体3(TLR3)的抗体，分析其在肾脏中的表达特征。用生物信息学分析及原核表达方式，分析、表达和纯化了双峰驼TLR3重组蛋白，并制备多克隆抗体，用间接酶联免疫吸附试验和免疫印迹法测定抗体效价及其特异性，利用制备的多克隆抗体采用免疫组织化学染色观察TLR3在双峰驼肾脏组织中的表达。结果显示，得到的目的蛋白大小与预测结果相符，为74 ku, IPTG最佳诱导浓度为0.2 mmol/L,最佳诱导时间为6 h,重组蛋白主要以包涵体形式表达，抗体效价达1∶64 000;免疫印迹结果显示，原核表达的TLR3蛋白和双峰驼肾脏组织中表达的TLR3蛋白均能被该抗体特异性识别，TLR3在双峰驼肾小管上皮细胞和肾小球系膜细胞均有表达。研究结果为进一步探究双峰驼TLR3在肾脏中发挥作用的机制积累了资料。

• 单位
  甘肃农业大学