诱导C57BL/6小鼠骨髓单核细胞向破骨细胞分化的条件

作者：曾立; 耿欢; 刘水涛; 姜川; 邢更彦

来源：中国医学前沿杂志(电子版), 2018, 10(01): 32-36.

• C57BL/6小鼠骨髓单核细胞
• 破骨细胞
• 巨噬细胞集落刺激因子
• 核因子κB受体活化因子配体

目的研究诱导C57BL/6小鼠骨髓单核细胞(bone marrow-derived macrophages,BMMs)向破骨细胞分化的条件,提高诱导破骨细胞的效率。方法采用流式细胞仪鉴定BMMs表面标记物,巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colonystimulating factor,M-CSF)与核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL)共同诱导BMMs,4天后形成破骨细胞,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)与鬼笔环肽染色鉴定诱导出的破骨细胞,通过骨板吸收实验鉴定破骨细胞的骨吸收活性。结果流式细胞仪检测BMMs的CD11b阳性率为98.4%。经过4天诱导,BMMs激活、融合产生了大量的破骨细胞,呈TRAP阳性,鬼笔环肽染色可见纤维肌动蛋白环形成,骨板上形成大量不规则的骨吸收瘢痕。结论 RANKL诱导BMMs 4天可产生骨吸收活性较高的破骨细胞。

• 单位
  中国人民武装警察部队总医院; 武警后勤学院