慢病毒介导PIK3R2基因沉默对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其机制研究

作者：周业娣^*; 成晓燕; 钱琳玉

来源：中国性科学, 2020, 29(09): 16-20.

• 慢病毒
• PIK3R2
• 宫颈癌
• 细胞增殖
• 迁移
• 侵袭

目的通过体外实验探讨沉默PIK3R2基因对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响和机制。方法 qRT-PCR和Western blot技术检测正常宫颈细胞Ect1/E6E7和4种宫颈癌细胞(C33A、HeLa、SiHa和CaSki)中PIK3R2的表达。将携带PIK3R2 shRNA的慢病毒载体转染SiHa细胞,建立稳定沉默PIK3R2的细胞株LV-PIK3R2-shRN,MTT法检测细胞增活力,Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot检测增殖相关基因(CyclinD1和p21)、迁移侵袭相关基因(MMP-2和MMP-9)及PI3K/Akt信号通路重要蛋白(PI3K、p-PI3K、Akt和p-Akt)的表达水平。结果与正常宫颈细胞Ect1/E6E7相比,4种宫颈癌细胞C33A、HeLa、SiHa、CaSki中PIK3R2 mRNA和PIK3R2蛋白相对表达量显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与LV-NC组相比,LV-PIK3R2-shRNA组SiHa细胞PIK3R2蛋白的表达显著降低,SiHa细胞在24h、48h、72h和96h时间点细胞活力显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与LV-NC组相比,LV-PIK3R2-shRNA组SiHa细胞的迁移和侵袭细胞数目显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与LV-NC组比较,LV-PIK3R2-shRNA组p-PI3K和p-AKT蛋白的表达显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与LV-NC组相比,LV-PIK3R2-shRNA组SiHa细胞的增殖活力显著降低,迁移和侵袭细胞数目显著减少差异具有统计学意义(P<0.05);与LV-PIK3R2-shRNA组相比,LV-PIK3R2-shRNA+激动剂组SiHa细胞的增殖活力显著升高,迁移和侵袭细胞数目显著增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论沉默PIK3R2可抑制PI3K/AKT信号通路激活,进而抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

• 单位
  南通市妇幼保健院