双引物一条探针的实时荧光RT-PCR检测葡萄卷叶病毒3

作者：李金庆; 阮国栋; 孙铭璐; 徐娟; **霞; 曲直; 邹强; 段效辉^*

来源：中国口岸科学技术, 2022, 4(12): 52-57.

• 双引物一条探针实时荧光RT-PCR
• 葡萄卷叶病毒3
• 检测

葡萄卷叶病毒3(GLRaV-3)被认为是葡萄卷叶病最重要的致病因子。本研究根据NCBI核酸数据库中葡萄卷叶病毒3复制酶基因序列保守区，设计合成2对上下游引物和1条Taq Man探针，组成2套反应组合。以病毒RNA反转录合成的c DNA为模板，依据2组引物序列和相同的Taq Man探针序列，在荧光PCR特异性、灵敏度、扩增效率对比试验的基础上，建立了双引物一条探针的实时荧光RT-PCR检测GLRaV-3的新方法，病毒RNA检测下限可达4.5 fg/μL。两套组合相互验证，减少非特异性扩增，进一步提高了方法的特异性。