摘要

目的探讨葡萄籽原花青素(GSP)通过下调微小RNA-34a(miR-34a)对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞损伤的影响。方法体外培养心肌细胞H9c2,建立H2O2诱导心肌细胞损伤模型。用MTT法检测心肌细胞存活情况并筛选H2O2最适作用浓度。将细胞分为7组:空白对照组(无任何处理的心肌细胞),模型组(300μmol·L-1H2O2的无血清培养液)和低、中、高3个剂量实验组(GSP:10,20,40μmol·L-1)以及阴性转染组(将miR-34a阴性对照质粒转染至模型组心肌细胞)、转染组(将miR-34a mimics质粒转染至高剂量实验组心肌细胞),均培养12 h。用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;用实时荧光定量PCR法检测miR-34a表达水平。结果培养12 h后,空白对照组、模型组和高剂量实验组的细胞凋亡率分别为(3. 72±0. 62)%,(52. 03±2. 67)%和(15. 21±1. 52)%;空白对照组、模型组和高剂量实验组的miR-34a水平(2-ΔΔCt值)分别为1. 01±0. 12,3. 16±0. 52和1. 52±0. 25,模型组与空白对照组比较,或高剂量实验组与模型组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0. 05)。模型组、阴性转染组、高剂量实验组和转染组的心肌细胞存活率分别为(50. 13±3. 35)%,(49. 02±3. 21)%,(86. 37±4. 39)%和(68. 16±2. 36)%,高剂量实验组和转染组与模型组比较,细胞存活率均显著升高,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论 GSP可减轻H2O2诱导的心肌细胞损伤,其可能通过下调miR-34a表达进而保护心肌细胞。

全文