益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

作者：杨金伟; 郭志华; 李雅^*; 张彤瑜; 邓奕辉^*

来源：中药新药与临床药理, 2021, 32(09): 1245-1253.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2021.09.003

• 益心泰含药血浆
• 心肌成纤维细胞
• 血管紧张素Ⅱ
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• TGF-β1
• Bax/Bcl-2

目的探讨益心泰含药血浆对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖、凋亡的影响及相关机制。方法将分化完全的CFs随机分为空白血浆组、模型组、益心泰含药血浆组,每组6个复孔。除空白血浆组外,其余各组以AngⅡ(10-7mol·L-1)诱导构建细胞增殖及纤维化模型。空白血浆组及模型组以15%空白血浆培养,益心泰含药血浆组以15%益心泰含药血浆培养,干预24 h。采用CCK-8法检测CFs细胞增殖情况;ELISA法测定细胞中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)及转化生长因子(TGF-β1)含量;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;Western Blot法检测细胞中TGF-β1、B细胞白血病/淋巴瘤-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达水平;RT-qPCR法检测CFs的增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CollagenⅠ/ⅢmRNA表达水平。结果 15%益心泰含药血浆对CFs无明显的促细胞增殖或抑制作用。与空白血浆组比较,模型组细胞G0/G1期的细胞百分率明显降低(P<0.01),S期和G2/M期的细胞百分率明显升高(P<0.01);细胞凋亡率有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05);Ⅰ/Ⅲ型胶原含量及TGF-β1水平均显著升高(P<0.01);TGF-β1、Bcl-2蛋白表达明显上调(P<0.01),Bax蛋白表达明显下调(P<0.01);PCNA、α-SMA、CollagenⅠ/ⅢmRNA表达水平均明显升高(P<0.01)。与模型组比较,益心泰含药血浆组细胞的G0/G1期细胞百分率明显升高(P<0.01),S期和G2/M期的细胞百分率明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01);Ⅰ、Ⅲ型胶原含量及TGF-β1水平明显降低(P<0.01);TGF-β1、Bcl-2蛋白表达明显下调(P<0.01),Bax蛋白表达明显上调(P<0.01);PCNA、α-SMA、CollagenⅠ/ⅢmRNA表达水平均明显降低(P<0.01)。结论益心泰含药血浆能够抑制CFs细胞增殖分化及纤维化,可能与其调控Bax/Bcl-2平衡及下调纤维化相关因子表达有关。

• 单位
  湖南中医药大学