猪流行性腹泻病毒E基因真核表达载体的构建及融合蛋白的表达

作者：郑亮; 邹德华; 程丽鑫; 李兴志; 张雅婷; 沈玉江; 武雪宁; 徐嘉欣; 王显赫; 张华^*; 曹宏伟^*

来源：黑龙江八一农垦大学学报, 2018, 30(04): 81-85.

• PEDV
• E基因
• 载体构建
• 蛋白表达

E蛋白是猪流行性腹泻病毒的小膜蛋白,为了研究E蛋白在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,构建了PEDV E基因的真核表达载体。通过RT-PCR技术扩增E基因片段,经双酶切连接至pEGFP-N1载体,酶切鉴定及测序结果证实PEDV E基因成功克隆到pEGFP-N1中,并将重组质粒命名为pEGFP-N1-E。将pEGFP-N1-E转染He La,利用Western Blot和免疫荧光技术检测pEGFP-N1-E的表达以及定位情况,结果显示pEGFP-N1-E在He La细胞中成功表达,并且在胞质胞核均匀分布。结果表明:pEGFP-N1-E已被成功构建,并且在He La细胞中正确表达。为后续研究关于E基因的功能及其在抗病毒中所发挥的作用等方面奠定了研究基础。

• 单位
  黑龙江八一农垦大学; 生命科学技术学院