一种基于链霉素沉淀的PrP~(Sc)检测方法的建立

作者：董辰方; 黄银霞; 安润; 陈建明; 王小凡; 单冰; 雷艳君; 韩露; 张宝云; 韩俊; 董小平

来源：病毒学报, 2008, (03): 185-189.

DOI：10.3321/j.issn:1000-8721.2008.03.004

• 朊病毒
• 链霉素沉淀
• Western blot
• 分子诊断技术

建立一种新的基于链霉素沉淀的PrPSc的Western blot检测方法,用终浓度为60mmol/L的链霉素处理蛋白酶K消化的PrPSc贮存液,通过离心沉淀PrPSc,用Western blot对PrPSc的链霉素富集效果进行检测。结果显示,链霉素能够与PrPSc结合形成高分子量复合物,但不影响糖基化形式。此外,基于链霉素沉淀的Western blot,无论是在低浓度或是大容积的条件下,均可显著地提高对PrPSc检测的敏感性。基于链霉素沉淀的Western blot试验是一种敏感、特异、快速及灵活的检测方法,有潜力用于脑组织、外周组织及体液中低水平的PrPSc的检测。

• 单位
  中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所; 传染病预防控制国家重点实验室