摘要
为探索赤眼鳟TLR19(Sc TLR19)与已报道草鱼TLR19(Ci TLR19)的结构及功能差异,实验克隆了Sc TLR19基因全长并分析其结构特点,利用实时荧光定量PCR(qPCR)分析其组织表达及草鱼呼肠孤病毒(GCRV)感染后的表达特征,同时采取过表达实验揭示其对TLR19信号通路下游功能基因的激活特性。结果显示,Sc TLR19基因编码957个氨基酸,与Ci TLR19氨基酸序列具有高度相似性(94.04%);但Sc TLR19胞外区由9个亮氨酸重复序列(LRR)组成,比Ci TLR19在654~677氨基酸位点之间明显多1个LRR,且在三级结构上相应多2个α-螺旋和6个β-折叠。Sc TLR19广泛表达于赤眼鳟各组织,GCRV攻毒后,其表达水平在免疫组织肾脏中显著上调。赤眼鳟鳍条细胞系过表达Sc TLR19并接受GCRV攻毒后,干扰素调节因子IRF7在攻毒期间的表达水平与对照组无显著差异,而干扰素调节因子IRF3在攻毒12和24 h的表达水平显著上调,且衔接蛋白MyD88和TRIF的表达水平均显著上调。研究表明,与Ci TLR19相比,Sc TLR19同样只对IRF3而不对IRF7进行调控,但不同于Ci TLR19单一调控TRIF的模式,其同时对MyD88和TRIF二者进行调控,可能介导更多样的抗病毒免疫反应。
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