靶向EGFR基因的siRNA表达载体构建及其生物学效应的研究

作者：白莉; 祝蓉; 陈智鸿; 白春学; 高磊; 张新

来源：第三军医大学学报, 2005, 27(23): 2307-2310.

DOI：10.3321/j.issn:1000-5404.2005.23.001

• 表皮生长因子受体
• RNA干扰
• 肺腺癌
• 细胞
• 生长

目的构建靶向表皮生长因子受体(EGFR)基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pSi-EGFR),并观察其抑制人肺腺癌细胞株A549中EGFR基因表达的效果及生物学效应。方法利用Lipofectamine2000将构建的pSi-EGFR载体转入A549细胞中,应用实时定量荧光PCR、免疫荧光和流式细胞仪检测EGFR基因mRNA和蛋白水平的表达,并采用四甲基偶氮唑蓝显色法(MTT)、集落形成实验观察细胞生长变化。结果pSi-EGFR可显著抑制A549细胞中EGFR基因的表达;转染pSi-EGFR细胞生长抑制率为67.8%,集落形成抑制率为59·4%。结论pSi-EGFR载体能够在A549细胞中引发RNA干扰(RNAi)效应下调EGFR基因表达来抑制细胞增殖。

• 单位
  复旦大学附属中山医院