摘要
本研究旨在揭示miR-192-5p对胰腺癌(pancreatic cancer, PC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响,为胰腺癌的临床诊断和治疗提供实验依据。采用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR, RT-qPCR)检测miR-192-5p在人正常胰腺上皮细胞hTERT-HPNE和胰腺癌细胞系AsPC-1中的表达水平;利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)、集落形成、划痕以及Transwell实验检测miR-192-5p对AsPC-1细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力的影响;生物信息学方法预测miR-192-5p的候选靶基因,并通过双萤光素酶报告实验对miR-192-5p的靶基因进行验证;RT-qPCR检测miR-192-5p对E盒锌指结合同源框2(Zinc finger E-box binding homeobox 2,ZEB2)mRNA表达的影响。结果显示,miR-192-5p在胰腺癌细胞系AsPC-1中的表达水平明显低于正常胰腺上皮细胞hTERT-HPNE中的;胰腺癌细胞系AsPC-1中转染miR-192-5p mimics后其miR-192-5p的表达水平显著升高,并能抑制ZEB2 mRNA的表达,抑制胰腺癌细胞系AsPC-1的增殖、集落形成、迁移和侵袭;胰腺癌细胞系AsPC-1中转染miR-192-5p inhibitor后其miR-192-5p的表达显著降低,促进ZEB2 mRNA的表达,促进胰腺癌细胞系AsPC-1的增殖、集落形成、迁移和侵袭;双萤光素酶报告实验表明ZEB2是miR-192-5p的功能靶基因。本研究结果提示miR-192-5p可能通过靶向ZEB2而抑制胰腺癌细胞系AsPC-1的增殖、迁移和侵袭。
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单位华北理工大学; 基础医学院; 唐山市人民医院