除草剂异丙甲草胺特异性抗体制备及免疫检测方法的建立

作者：许晶晶; 王兰腾; 赖玉健; 李向梅; 雷红涛; 沈兴^*

来源：现代食品科技, 2019, 35(10): 246-252.

DOI：10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.10.033

• 异丙甲草胺
• 多克隆抗体
• 间接竞争酶联免疫吸附(ic-ELISA)

为检测食品中的异丙甲草胺农药残留,降低其对人体可能造成的危害,本文建立了基于抗体的酶联免疫分析方法。首先以除草剂异丙甲草胺、3-巯基丙酸为原料合成半抗原,经由氢核磁共振和质谱方法鉴定后,通过碳二亚胺(EDC)法将半抗原与载体蛋白偶联制备异丙甲草胺人工抗原,免疫新西兰大白兔获取抗体,通过棋盘滴定确定抗原抗体最佳稀释倍数,ELISA反应的抗体稀释液为PBS(1%PEG 6000),药物稀释液为PBS(10%甲醇),在此基础上建立间接竞争ELISA标曲,其IC50为14.64 ng/mL,检测限(limit of detection,LOD)为0.8 ng/mL,线性检测范围IC20～IC80为1.51～141.92 ng/mL。与14种结构类似物进行交叉反应,交叉反应率低于3%。向环境水样中添加异丙甲草胺,回收率为86.60%～102.16%,变异系数(RSD)为7.05%～13.30%。此抗体灵敏度高特异性好,可用于食品和环境中异丙甲草胺的监测。

• 单位
  华南农业大学