miR-101靶向调节ZEB1对胃癌细胞上皮间质转化及化疗敏感性的影响

作者：苏智祥; 于滨^*; 李旭; 孙海风

来源：中华内分泌外科杂志, 2020, 14(06).

• 微小RNA-101
• 锌指E盒增强子结合蛋白1
• 胃癌
• 上皮间质转化

目的探讨微小RNA(miR)-101靶向调节锌指E盒增强子结合蛋白1(ZEB1)对胃癌细胞上皮间质转化(EMT)及化疗敏感性的影响。方法体外培养人胃癌MGC-803细胞, 分为对照组(不做处理)、顺铂组(8 μmol/L顺铂)、mimic NC组(8 μmol/L顺铂+转染negative control-miR-101)、miR-101 mimic组(8 μmol/L顺铂+转染hsa-miR-101 mimic)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组MGC-803细胞中miR-101、ZEB1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(Fibronectin)mRNA表达情况;双荧光素酶报告基因实验验证miR-101与ZEB1的靶向作用关系;蛋白印迹(WB)法检测各组MGC-803细胞中相关蛋白表达情况;CCK-8法检测各组MGC-803细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组MGC-803细胞凋亡情况。结果与对照组相比, 顺铂组MGC-803细胞中miR-101、E-cadherin mRNA及蛋白表达水平、细胞凋亡率显著升高[(1.01±0.09)vs(1.25±0.08), (1.00±0.10)vs(1.37±0.12), (0.26±0.04)vs(0.49±0.07), (6.85±0.95)% vs(15.44±1.12)%, (P<0.05)], ZEB1、N-cadherin、Vimentin、Fibronectin mRNA及蛋白表达水平、细胞OD值显著降低[(1.02±0.10)vs(0.82±0.08),(1.02±0.08)vs(0.73±0.09),(0.98±0.09)vs(0.79±0.09),(0.99±0.08)vs(0.66±0.09),(0.59±0.06)vs(0.30±0.05), (P<0.05)];与mimic NC组相比, miR-101 mimic组MGC-803细胞中miR-101、E-cadherin mRNA及蛋白表达水平、细胞凋亡率显著升高[(1.26±0.08)vs(1.57±0.10), (1.35±0.11)vs(1.66±0.11), (0.51±0.09)vs(0.68±0.09), (16.12±1.05)% vs(39.97±1.84)%, (P<0.05)], ZEB1、N-cadherin、Vimentin、Fibronectin mRNA及蛋白表达水平、细胞OD值显著降低[(0.84±0.08)vs(0.65±0.07), (0.76±0.09)vs(0.55±0.08), (0.75±0.08)vs(0.61±0.07), (0.65±0.07)vs(0.47±0.07), (0.31±0.05)vs(0.22±0.04)(P<0.05)]。结论 miR-101可能通过靶向抑制ZEB1表达, 抑制MGC-803细胞EMT过程, 并提高癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性。

• 单位
  陕西省肿瘤医院