淫羊藿总黄酮含药血浆对雄兔干眼泪腺上皮细胞凋亡模型Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达的影响

作者：邓杰; 王方^*; 张姣姣; 洪作权; 万**; 石玉恒; 胡文婧

来源：眼科新进展, 2019, 39(02): 118-122.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2019.0027

• 干眼
• 淫羊藿总黄酮
• Caspase-3 mRNA
• Caspase-8 mRNA

目的观察淫羊藿总黄酮含药血浆对雄兔干眼泪腺上皮细胞Caspase-3、Caspase-8 mRNA表达的影响。方法取61只健康无眼疾1月龄雄性新西兰大耳白兔,随机取1只雄兔泪腺,培养泪腺上皮细胞,取第3代泪腺上皮细胞用于实验。60只雄兔随机分成淫羊藿总黄酮10.0倍组、5. 0倍组、2.5倍组和空白对照组,通过MTT法确定后续干预细胞的含药血浆的浓度。将所培养第3代泪腺上皮细胞随机分为淫羊藿总黄酮治疗组、含雄激素培养对照组和空白组(DMEM/F12低糖培养基中分别加入含淫羊藿总黄酮血浆、10-6mol·L-1丙酸睾酮和空白血浆)。干预48 h后各组均加入H2O2继续培养60 min诱导细胞凋亡,采用RT-PCR法检测各组细胞凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8 mRNA的表达。结果 MTT实验显示应选取淫羊藿总黄酮2. 5倍组作为干预细胞含药血浆的浓度。淫羊藿总黄酮10. 0倍组、5. 0倍组、2. 5倍组和空白对照组兔血浆中朝藿定A浓度分别为120. 5μg·L-1、65. 7μg·L-1、21. 9μg·L-1、0μg·L-1,淫羊藿苷浓度分别为130. 8μg·L-1、45. 3μg·L-1、18. 9μg·L-1、0μg·L-1。淫羊藿总黄酮治疗组、含雄激素培养对照组、空白组的Caspase-3 mRNA相对含量分别为0. 35±0. 07、0. 68±0. 18、1. 00±0. 19,Caspase-8 mRNA相对含量分别为0. 27±0. 21、0. 72±0. 10、1. 00±0. 15。空白组Caspase-3、Caspase-8mRNA的表达均高于含雄激素培养组,空白组和含雄激素培养组均高于淫羊藿总黄酮治疗组,差异均有统计学意义(均为P <0. 05)。结论淫羊藿总黄酮能够下调雄兔干眼泪腺上皮细胞Capase-3、Capase-8 mRNA的表达,这可能是其治疗干眼的关键机制之一。

• 单位
  贵阳中医学院第二附属医院