摘要
目的通过体外培养骨关节炎(OA)软骨细胞体系,了解氨基葡萄糖对白细胞介素(IL)-1β诱导OA软骨细胞蛋白聚糖分解代谢的影响。方法软骨细胞采自OA患者,采用分阶段酶消化法体外原代培养人软骨细胞。在培养液中加入IL-1β诱导剂,设立兔血清对照组、IL-1β实验对照组和氨基葡萄糖加药实验组;给予实验兔以氨基葡萄糖等效剂量灌胃后,抽取含药血清培养细胞。采用3种方法了解蛋白聚糖的代谢水平:①用二甲基亚甲蓝分光光度法(DMMB法)检测细胞中及培养液中的糖胺多糖(GAG)含量;②酶联免疫吸附法检测培养液中蛋白聚糖的不同代谢片段(Mab-3B3和5D4);③反转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法检测软骨...
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