利用环介导等温扩增技术快速检测金枪鱼制品中的鲣鱼成分

作者：许文杰; 李秋萍; 崔晓文; 操敏; 李壹; 熊晓辉; 熊雄^*

来源：食品与发酵工业, 2022, 48(08): 233-238.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.028367

• 环介导等温扩增
• 鲣鱼
• 掺假
• 物种鉴定

该研究建立了金枪鱼制品中的鲣鱼成分的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)检测方法。针对线粒体Cyt b基因设计了鲣鱼的特异性引物，着重对内引物FIP/BIP、dNTP Mix、缓冲液和Mg2+浓度等反应参数进行了优化，扩增产物采用恒温实时荧光仪和可视化核酸染料SYBR Green I进行检测，对方法的特异性和灵敏度进行了评价。结果表明，在0.2μmol/L外引物(F3和B3)、1.6μmol/L内引物(FIP和BIP)、1.6 mmol/L dNTP Mix、3.5μL 10×ThermoPol缓冲液、6 mmol/L Mg2+等参数的优化条件下扩增效果最佳。该方法特异性强，灵敏度高。其检测限为50 pg/μL。采用此LAMP方法对59份市售样品进行检测，检出6份为阳性样品，与DNA条形码检测结果一致。该研究建立的LAMP检测方法可应用于金枪鱼制品中鲣鱼成分的快速特异检测，为监管机构提供技术支持。

• 单位
  南京工业大学