抗IL-33全人源scFv-Fc抗体的可溶性表达与鉴定

作者：王栩; 袁青; 叶迎春; 于红; 徐文峰; 杨燕; 年四季

来源：现代免疫学, 2016, (06): 462-465.

• scFv-Fc
• IL-33
• 可溶性表达 scFv-Fc
• IL-33
• soluble expression

通过对通用型在细菌中可溶性表达scFv-Fc抗体载体的构建,对抗IL-33全人源scFv-Fc抗体进行可溶性表达并鉴定。扩增人IgG1Fc片段及前期筛选的抗IL-33单链抗体(scFv)DNA,分别插入到改建的载体pLZ16中,构建可溶性重组表达pLZ16-scFv-Fc质粒。将重组质粒转入E.coli DH5αF’,菌落经PCR和测序验证表明我们成功构建了pLZ16-scFv-Fc重组质粒。将阳性克隆子分别于32℃IPTG表达5h或25℃无IPTG表达50h,用HRP标记抗人IgG1Fc抗体进行检测,结果显示25℃无IPTG表达50h时,表达蛋白分泌在细菌周质间,可明显检测到scFv-Fc的...

• 单位
  西南医科大学