摘要
目的研究COX-2基因沉默对人胃癌细胞系SGC-7901裸鼠成瘤的影响。方法构建靶向COX-2的短发夹状双链RNA(shRNA)的真核表达质粒转染人胃癌细胞系SGC-7901,采用RT-PCR和Westernblot分别从mRNA和蛋白质水平检测抑制效果。15只裸鼠随机分为3组,每组5只,皮下接种胃癌细胞。抑制组:接种转染抑制质粒的胃癌细胞;正常对照组:接种未转染的胃癌细胞;阴性对照组:接种转染阴性对照质粒的胃癌细胞。接种4周后比较各组裸鼠皮下形成瘤体的大体和病理情况并计算抑瘤率。结果转染靶向COX-2的shRNA抑制质粒后细胞中COX-2的表达被明显抑制,抑制率为70.42%。正常对照组和阴性对照组所有裸鼠均有瘤体形成,平均瘤质量分别为(0.49±0.017)g和(0.49±0.013)g。抑制组仅2只有瘤体形成,平均瘤质量(0.05±0.003)g,与正常对照组相比差别有统计学意义(P<0.01),抑瘤率为89.8%。结论运用RNA干扰可以高效特异地抑制人胃癌细胞系SGC-7901中COX-2的表达,COX-2被抑制后SGC-7901的生长和活性也被明显抑制。
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单位华中科技大学同济医学院; 协和医院; 东南大学附属中大医院