谷氨酰胺抑制NLRP3/Caspase-1通路减轻坏死性小肠结肠炎大鼠肠损伤

作者：赖永森; 向绍蓉^*

来源：内科急危重症杂志, 2022, 28(06): 508-512.

DOI：10.11768/nkjwzzzz20220617

• 谷氨酰胺
• 坏死性小肠结肠炎
• 新生大鼠
• 炎症反应
• NLRP3/Caspase-1通路

目的：探究谷氨酰胺(Gln)对坏死性小肠结肠炎(NEC)新生大鼠肠损伤的保护作用，及其与核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)通路之间的关系。方法：将新生SD大鼠随机分成对照组、模型组、谷氨酰胺(Gln)组和Gln+NLRP3激活剂(DDC)组，每组12只。除对照组外，其他3组均采用缺氧和冷刺激建立NEC模型。在造模的同时，Gln组大鼠给予Gln 0.3g/kg灌胃，DDC组大鼠给予Gln 0.3 g/kg和二乙基二硫代氨基甲酸酯(DDC)30 mg/kg灌胃，给药1次/d,连续3 d,末次灌胃空腹24 h后，采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测4组大鼠血清中白介素-18(IL-18)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平；心脏取血后打开腹腔，取回盲部近端肠组织1～2 cm,苏木素-伊红(HE)染色检测大鼠肠组织病理学变化并进行损伤评分；TUNEL试剂盒检测大鼠肠细胞凋亡指数；蛋白印迹(WB)法检测肠组织NLRP3、Caspase-1蛋白表达水平。结果：模型组、Gln组和DDC组大鼠在造模24 h后，相继出现不同程度的腹胀、腹泻、活动减少等现象；与模型组比较，Gln组大鼠临床症状出现较晚且程度减轻，活动度较好。与对照组比较，模型组大鼠肠组织可见大量炎性细胞浸润、结构坏死等病变，肠组织损伤评分、细胞凋亡指数、IL-18、IL-1β、TNF-α含量及NLRP3、Caspase-1蛋白相对表达量显著升高(P均<0.05)。与模型组比较，Gln组肠组织病变减轻，肠组织损伤评分、细胞凋亡指数、IL-18、IL-1β、TNF-α含量及NLRP3、Caspase-1蛋白相对表达量显著降低(P均<0.05)。与Gln组比较，DDC组大鼠肠组织病变加重，肠组织损伤评分、细胞凋亡指数、IL-18、IL-1β、TNF-α含量及NLRP3、Caspase-1蛋白相对表达量显著升高(P均<0.05)。结论：Gln可减轻NEC大鼠的炎症水平，保护肠组织结构，其机制可能与抑制NLRP3/Caspase-1信号通路有关。

• 单位
  湖北民族大学; 深圳市龙华区人民医院