肝癌细胞外泌体鉴定及其对肝细胞的影响

作者：车小红; 张咏梅^*

来源：生物医学工程与临床, 2023, 27(04): 420-425.

DOI：10.13339/j.cnki.sglc.20230626.001

• Hepa1-6细胞
• 外泌体
• AML12细胞
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• 细胞功能

目的 鉴定小鼠肝癌细胞Hepa1-6来源的外泌体（Hepa1-6 Exos），探讨Hepa1-6 Exos与小鼠正常肝细胞AML12共孵育时细胞摄取外泌体效率及对细胞增殖、凋亡和细胞功能的影响。方法 提取Hepa1-6 Exos；透射电子显微镜和纳米颗粒分析仪鉴定外泌体形态和粒径分布；Western blot实验检测外泌体特异性蛋白；免疫荧光技术分析AML12细胞摄取外泌体效率；CCK-8和transwell侵袭实验检测外泌体对AML12细胞增殖和凋亡能力的影响；定量聚合酶链式反应（qPCR）和Western blot实验分析外泌体对AML12细胞功能的影响。结果 Hepa1-6 Exos呈茶托样形态，粒径为50～200 nm，表达特异性蛋白CD9、CD63和TSG101。AML12细胞可高效摄取Hepa1-6 Exos。与正常AML12细胞对照组相比，Hepa1-6 Exos可促进AML12细胞增殖，24 h、48 h、72 h细胞增殖率分别为（10.15±0.91）%、（16.61±1.56）%、（28.57±1.53）%（均P <0.05）；与正常AML12细胞对照组相比，Hepa1-6 Exos可抑制AML12细胞凋亡，24 h、48 h、72 h细胞凋亡率分别为（2.81±0.17）%、（2.10±0.57）%、（1.96±0.85）%（均P <0.05）。Hepa1-6 Exos能增强AML12细胞白蛋白（ALB）和α1-抗胰蛋白酶（A1AT）的表达。结论 Hepa1-6 Exos可促进AML12细胞的增殖，抑制其凋亡，并增强AML12细胞ALB和A1AT的表达。