猪圆环病毒3型和4型双重PCR检测方法的建立

作者：侯承尧; 徐通; 崔建涛; 田润博; 郑兰兰; 赵丽; 陈红英^*

来源：中国兽医学报, 2021, 41(09): 1682-1703.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2021.09.02

• 猪圆环病毒3型
• 猪圆环病毒4型
• Rep基因
• Cap基因
• 双重PCR

为了检测和鉴别猪圆环病毒3型(PCV3)和4型(PCV4),根据GenBank已登录的PCV3和PCV4基因序列,在PCV3 Rep和PCV4 Cap基因的高度保守区域设计并合成2对特异性引物,经过双重PCR反应条件优化,建立了能够同时检测PCV3/4的双重PCR方法。结果显示,该方法能同时扩增出138 (PCV3)和391 bp(PCV4)特异片段,而对PCV2、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒和猪流行性腹泻病毒核酸扩增结果均为阴性。PCV3/4的检测极限分别为74.5,90.2拷贝/μL。经临床样本检测结果表明,本试验建立了同时检测PCV3/4双重PCR方法,且具有准确、可靠、灵敏度高、特异性强的特点,为PCV3/4的临床检测和鉴别诊断提供了技术支持。

• 单位
  河南牧业经济学院; 河南农业大学; 医药学院