双波长HPLC-荧光法同时测定褪黑素和维生素B6

作者:刘丽艳; 张宏馨*; 黄珊; 廉海晨; 白洁; 韩艳梅*; 吴素焕
来源:河北大学学报(自然科学版), 2019, 39(05): 491-497.

摘要

建立了双波长高效液相色谱-荧光检测器同时检测保健品中褪黑素和维生素B6含量的方法.考察了不同超声时间、清洗次数对保健品中褪黑素和维生素B6溶出量的影响,并对色谱条件进行了优化.采用Inertsil-100A C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水(65∶35,体积比)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温25℃,进样量10μL.采用双波长法,0~4 min,λex=332 nm,λem=397 nm;4 min后,λex=286 nm,λem=352 nm.在优化的样品预处理条件、色谱条件下,维生素B6和褪黑素分别在0.1~100μg/L和1.0~1 000μg/L内线性关系良好(r≥0.998),最低检出限分别为3×10-3μg/L和3×10-2μg/L;定量限分别为1×10-2μg/L和1×10-1μg/L,平均回收率分别为99.07%和97.97%(n=3),相对标准偏差为0.04%~0.98%.本方法检测快速,灵敏,重现性较好,可用于保健品中褪黑素和维生素B6的同时测定以及市售保健品的质量控制.