RNAi靶向人端粒酶逆转录酶对人肝癌细胞的生长抑制作用

作者：李华; 王欣璐; 杨扬; 张剑; 汪根树; 姜楠; 陈规划

来源：南方医科大学学报, 2008, 28(08): 1323-1326.

DOI：10.3321/j.issn:1673-4254.2008.08.002

• RNA干扰
• 人端粒酶逆转录酶
• 基因治疗
• 细胞凋亡 RNA interference
• human telomerase reverse transcriptase
• gene therapy
• cell apoptosis

目的利用RNAi技术降低人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的表达,抑制其活性,研究其对人肝癌细胞的增殖和凋亡影响。方法构建针对hTERT基因的siRNA真核表达载体pLXSN-EGFP-U6-siTERT,制备靶向hTERT的重组逆转录病毒;用重组逆转录病毒感染HepG2人肝癌细胞,以TRAP法检测端粒酶活性变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;MTT法检测肿瘤细胞生长抑制情况。结果成功制备出hTERTsiRNA逆转录病毒表达载体;重组病毒感染HepG2细胞24、48、72h后端粒酶活性分别下降了23.84%、58.03%和85.01%(P<0.05);感染后24h细胞凋亡率29.05%;MTT实验结果显示肿瘤生长受到抑制,并存在一定量效和时效关系。结论hTERTsiRNA能特异性使hTERT基因表达抑制,端粒酶活性下降,肝癌细胞增殖受到抑制。

• 单位
  广州军区广州总医院; 中山大学附属第三医院