茶叶多酚氧化酶三相分离纯化及酶学性质研究

作者：刘洋; 陈勤操; 刘德春; 杨莉; 胡威; 匡柳青; 刘勇^*; 滕杰^*

来源：食品工业科技, 2022, 43(09): 119-124.

DOI：10.13386/j.issn1002-0306.2021080075

• 茶叶
• 三相分离法
• 多酚氧化酶
• 酶学性质

为研究一种快速高效的茶叶多酚氧化酶(polyphenol oxidase, PPO)制备方法，本试验采用三相分离法(three phase partitioning, TPP)获取茶叶PPO，并研究其酶学特性。结果表明，通过两次三相分离纯化后可获得酶比活力210.46 U/mg、纯化15.76倍、回收率8.04%的茶叶PPO，其最亲和底物为邻苯三酚(Km=6.82 mmol/L,Vmax=5.36×10-2 OD/min)，最适反应温度和pH分别为45℃和pH5.5，在25℃和pH4.5～7.0时具有较好的稳定性。对纯化后茶叶PPO抑制作用最显著的化合物为抗坏血酸(IC50=2.42±0.18 mmol/L)，其次是草酸和EDTA，柠檬酸抑制效果最弱，而卤化物无显著影响(P>0.05)。表明三相分离法能够较好的保留茶叶PPO活性，且操作简便、耗时短、成本低，有利于工业化应用。

• 单位
  江西农业大学