O型口蹄疫病毒OA58株3C基因的克隆与真核表达

作者：刘萍; 丛国正; 杨孝朴; 沈小燕; 邵军军; 独军政; 林彤; 王光华; 易华山; 常惠芸; 谢庆阁

来源：中国兽医科学, 2007, (01): 20-23.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2007.01.005

• 口蹄疫病毒
• 3C基因
• 真核表达 foot-and-mouth disease virus
• 3C gene
• eukaryotic expression

利用RT-PCR技术扩增获得了长度约640 bp的口蹄疫病毒目的基因,回收片段后与pMD18-T载体进行连接,测序结果表明获得了口蹄疫病毒3C基因。将重组质粒pMD18-3C与表达载体pEGFP-N1分别用BamHⅠ+XhoⅠ双酶切后,进行定向亚克隆,对重组表达质粒pEGFP-3C进行PCR、酶切鉴定及DNA测序,结果表明重组表达质粒所含的3C基因读码框正确。用pEGFP-3C转染BHK-21细胞,荧光显示目的基因EGFP发出绿色荧光;对3C转录的mRNA进行RT-PCR鉴定,证实3C基因在BHK-21细胞中得到了表达。

• 单位
  中国农业科学院; 甘肃农业大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室