人脐血单个核细胞对大鼠腓肠肌失神经损伤的治疗作用

作者：刘子琳; 李栋; 时庆; 李聪; 黄金献; 朱华甦; 鞠秀丽^*

来源：山东大学学报(医学版), 2019, 57(02): 61-69.

• 干细胞治疗
• 人脐血单个核细胞
• 去神经支配
• 骨骼肌萎缩

目的制备大鼠坐骨神经离断后的腓肠肌萎缩模型,研究人脐血单个核细胞(CB-MNCs)肌肉多点注射对损伤的治疗效果。方法采集并制备新鲜人CB-MNCs;将30只4～6周龄Wistar大鼠随机分为正常对照组(Normal组,n=10)、CB-MNCs治疗组(Therapy组,n=10)和生理盐水治疗组(NS组,n=10),Therapy组和NS组大鼠离断坐骨神经,建立腓肠肌萎缩模型;在造模后第7天、第14天和第21天,分3次将CB-MNCs或等体积生理盐水多点注射到腓肠肌损伤局部,观察大鼠行动能力改变和足弓坏疽发展情况,并于第28天取样测定腓肠肌湿重比、肌肉横截面积,以及血液和腓肠肌中氧化应激相关指标、炎性因子水平和凋亡相关基因的表达,观察肌肉组织中血管内皮生长因子-α(VEGF-α)、α-肌动蛋白(α-actin)和肌营养不良蛋白(Dystrophin)的表达变化。结果 Therapy组大鼠足部坏疽面积和水肿程度明显比NS组减轻(P=0. 002),而且Therapy组中腓肠肌湿重比较NS组升高(P <0. 001);病理切片显示,Normal组、NS组和Therapy组肌肉横截面积分别为(12 452. 0±202. 8)、(6 287. 0±142. 2)和(8 193. 0±115. 5)μm2,差异有统计学意义(P <0. 001)。与NS组相比,Therapy组血清和肌肉肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)含量明显降低,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)含量明显增高(P <0. 001)。Therapy组较NS组半胱天冬酶-3(Caspase-3)、促凋亡基因Bax、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达量降低,抑凋亡基因Bcl-2、白细胞介素-10 (IL-10)、α-actin、Dystrophin和VEGF-α的mRNA表达量增高(P <0. 05)。与NS组相比,Therapy组α-actin、Dystrophin和VEGF-α蛋白表达均增高(P <0. 05)。免疫组化发现,NS组和Therapy组Dystro-phin表达均增加,但Therapy组明显高于NS组(P <0. 05)。结论肌肉注射CB-MNCs可有效促进腓肠肌失神经损伤的伤口愈合,缓解萎缩、促进肌肉修复,并降低凋亡细胞比例。

• 单位
  山东大学齐鲁医院; 山东大学