无血清培养下富血小板纤维蛋白提取液对牙髓干细胞增殖分化的影响

作者：王莹; 徐燕; 庞罡; 叶兴如; 何家林; 谢贤哲

来源：口腔医学研究, 2018, 34(07): 712-716.

DOI：10.13701/j.cnki.kqyxyj.2018.07.007

• 血小板
• 纤维蛋白
• 牙髓干细胞
• 成骨分化

目的:在无血清培养条件下,使用富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖及分化的影响。方法:从健康志愿者的阻生齿中分离培养hDPSCs,经细胞形态和流式细胞技术对其鉴定。实验组中使用含PRFe不含胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的α-最低必须培养基(α-minimal essential medium,α-MEM),对照组中使用含10%FBS的α-MEM。噻唑蓝(methyl thiazol tetrazolium,MTT)法检测培养17d的细胞增殖情况。成骨能力的测定采用碱性磷酸酶染色,实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitive-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)和runt相关转录因子2(runt-related transcription factor-2,RUNX-2)的表达。结果:hDPSCs高表达CD44、CD90和CD105,低表达CD34和CD45。两种培养基培养细胞形态相似,实验组的细胞形态更为纤长。随着诱导时间的增加,两组的成骨分化能力均上调(P<0.05),实验组成骨分化能力强于对照组(P<0.05)。结论:适宜浓度PRFe能够维持hDPSCs增殖分化。

• 单位
  安徽医科大学附属口腔医院; 中心实验室; 安徽医科大学; 安徽安科生物工程(集团)股份有限公司; 安徽安科生物工程（集团）股份有限公司