地参多糖抗人恶性黑色素瘤的作用及机制研究

作者：程婷婷; 李岩; 黄丽金; 李自霖; 陈贵元^*

来源：中药新药与临床药理, 2023, 34(01): 35-41.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2023.01.005

• 地参多糖
• 恶性黑色素瘤
• A375细胞
• 细胞增殖
• 细胞周期
• 细胞凋亡

目的 探讨地参多糖(LLP)抗人恶性黑色素瘤A375细胞的作用及机制。方法 在LLP(0、10、20、30,60 mg·mL-1)干预A375细胞24、48、72 h后，采用CCK-8法检测细胞的增殖。在LLP(0、30、60 mg·mL-1)干预A375细胞24、48 h后，采用划痕实验检测细胞迁移能力；干预48 h后，采用Transwell小室检测细胞侵袭能力；流式细胞术检测细胞周期及凋亡；Real-Time PCR法检测细胞凋亡、周期相关基因的表达；Western Blot法检测细胞凋亡、周期相关蛋白的表达。结果 与对照组相比，LLP在10～60 mg·mL-1范围对A375细胞的增殖具有显著抑制作用，细胞存活率显著降低(P<0.05,P<0.01)，且呈浓度、时间依赖性；30、60 mg·mL-1LLP处理细胞48 h后划痕宽度明显增加(P<0.05,P<0.01);LLP 30、60 mg·mL-1组穿过小室的细胞数量均显著减少(P<0.01),G0/G1期和G2/M期的细胞比例均明显升高(P<0.05,P<0.01),S期的细胞比例显著降低(P<0.01)，细胞凋亡率明显升高(P<0.05,P<0.01);LLP 30、60 mg·mL-1组A375细胞的Cyclin B1、CDK-1基因表达水平明显降低(P<0.01),Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9基因表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01)，细胞周期相关调节蛋白CDK-4、CDK-6、Cyclin D1、CDK-1、Cyclin B1蛋白表达均明显下调(P<0.05,P<0.01)，促凋亡蛋白Caspase-9、Caspase-3、Caspase-8、Bax蛋白表达均明显上调(P<0.05,P<0.01)，抑制凋亡蛋白Bcl-2蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论 LLP能有效抑制A375细胞的增殖、侵袭和迁移，阻滞其细胞周期于G0/G1期和G2/M期，并通过死亡受体通路和线粒体凋亡通路诱导其凋亡。

• 单位
  基础医学院; 大理大学