BDNF RNA干扰在多巴胺能PC12细胞凋亡中的作用研究

作者：卢海燕; 丁海霞; 冯美江; 董海蓉; 高蓉; 丁新生; 肖杭

来源：现代生物医学进展, 2009, 9(13): 2417-2420.

• 帕金森病
• 脑源性神经营养因子
• siRNA
• PC12细胞
• 凋亡

目的:探讨脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)在PC12细胞凋亡中的作用。方法:设计并合成针对BDNF mRNA序列的小片段干扰RNA(siRNA),利用lipofectamine 2000将siRNA转染入PC12细胞中或给与6-OHDA损伤,给与/不给予BDNF蛋白保护,采用定量PCR和免疫荧光法检测BDNF mRNA和蛋白表达水平;采用上清液乳酸脱氢酶(LDH)释放量测定和流式细胞仪法检测siRNA对细胞凋亡的影响。结果:转染siRNA的细胞的BDNF mRNA的表达量比正常组细胞减少73%,而转染作为对照的scrambled siRNA的细胞的BDNF mRNA的表达没有明显变化。BDNF RNA干扰与6-OHDA神经毒性一样可诱导PC12细胞的LDH释放和细胞凋亡。给予BDNF蛋白保护后细胞毒性减轻。结论:BDNF基因下调可以导致PC12细胞的凋亡,BDNF蛋白对PC12细胞有保护作用,为进一步进行动物体内研究奠定了基础。

• 单位
  南京医科大学; 公共卫生学院; 南京医科大学第一附属医院; 南京医科大学第二附属医院; 神经内科