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摘要
目的识别可与耳蜗外毛细胞Prestin互作的蛋白并分析其生物学功能,为探究Prestin蛋白的调控及作用机制提供线索。方法以豚鼠耳蜗为实验对象进行免疫共沉淀联合质谱技术鉴定可与Prestin相互作用的蛋白谱,使用生物信息学方法构建Prestin蛋白互作网络,通过交叉比对一级互作质谱蛋白谱与蛋白互作网络,确定豚鼠耳蜗外毛细胞Prestin的互作蛋白并进行功能注释。结果免疫共沉淀联合质谱分析结果显示可与Prestin蛋白相互作用的可信蛋白有116种,通过构建Prestin互作蛋白网络并与质谱结果进行匹配,经亚细胞定位后确定与Prestin具有直接互作关系的蛋白有8种:EEF2、HSP90AB1、FN1、FLNA、EEF1A1、HSP90B1、ATP5A1、ERH,其主要参与Prestin蛋白的合成转运、跨膜折叠与定位、维持蛋白的结构稳定、信号转导等方面。结论 EEF2、HSP90AB1、FN1、FLNA、EEF1 A1、HSP90B1、ATP5A1、ERH通过参与Prestin蛋白的合成转运、跨膜折叠与定位、信号转导等生物学过程构建Prestin蛋白在外毛细胞特殊的跨膜结构,为实现耳蜗外毛细胞的感音放大功能提供分子基础。
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单位公共卫生学院; 广东药科大学
