微小RNA-126-3p调控大鼠脊髓损伤后炎性反应的作用及其机制

作者：郭佳; 杨敏; 谢远龙; 魏任雄^*

来源：中华实验外科杂志, 2018, 35(07): 1304-1307.

• 脊髓损伤
• 微小RNA-126
• 白细胞介素-7
• 炎性反应

目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-126-3p调控大鼠脊髓损伤后炎性反应的作用及其机制。方法建立脊髓损伤SD大鼠模型,利用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测大鼠脊髓损伤后3、7、14 d脊髓组织中miR-126相对表达量,采用脊髓损伤运动功能(BBB)评分方法评估agomir-126注射对急性脊髓损伤模型大鼠运动功能的影响,采用在线靶基因预测数据库Targetscan预测miR-126-3p的靶基因,并采用双荧光素酶报告基因验证miR-126-3p的靶基因,将NEUR0-2A细胞转染150 nmol/L浓度miR-126-3p mimics 24 h后,采用Western blot检测细胞白细胞介素(IL)-7蛋白表达水平变化,采用Western blot检测agomir-126给药组和对照组组大鼠损伤节段脊髓组织炎症相关因子表达水平变化。结果模型组(2.13±0.44)大鼠3 d脊髓组织miR-126-3p表达量低于对照组(3.69±0.59,t=2.769,P=0.021)。模型组(1.85±0.42)大鼠7 d脊髓组织miR-126-3p表达量低于对照组(3.77±0.88,t=2.485,P=0.026)。模型组(1.33±0.28)大鼠14 d脊髓组织miR-126-3p表达量低于对照组(3.82±0.92,t=3.388,P=0.019)。agomir-126给药组3 d的BBB评分(4.690±0.530)高于对照组(3.650±0.350,t=3.661,P=0.006);agomir-126给药组7 d的BBB评分(5.880±0.620)高于对照组(3.690±0.650,t=5.452,=0.001);agomir-126给药组14 d的BBB评分(6.720±0.770)高于对照组(3.770±0.470,t=7.320,P=0.000)。IL-7-WT-3’UTR与miR-126-3p mimic共同转染组荧光素酶活性比值(6.920±0.556)显著低于对照组(13.690±0.925,t=10.870,P=0.000)。miR-126 mimic转染组(0.23±0.14)NEURO-2A细胞IL-7蛋白表达低于对照组(0.86±0.17,t=4.955,P=0.009)。给药组(0.369±0.093)SCI大鼠脊髓炎症指标IL-7蛋白表达量低于对照组(0.956+0.124,t=6.559,P=0.003);给药组(0.572±0.085)SCI大鼠脊髓炎症指标IL-1β蛋白表达量低于对照组(0.764±0.086,t=2.750,P=0.026);给药组(0.133±0.009)SCI大鼠脊髓炎症指标TGF-β蛋白表达量低于对照组(0.257±0.028,t=7.303,P=0.002)。结论 miR-126-3p在脊髓损伤中表达降低,而上调miR-126-3p能对脊髓损伤起着保护作用,其机制可能与其关键靶基因IL-7介导的脊髓损伤炎性反应有关。

• 单位
  武汉大学中南医院